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總巰基檢測試劑盒-微孔板

簡要描述：產(chǎn)品概述 product description 貝博TM BBcellProbe® 總巰基檢測試劑盒是利用經(jīng)典的Ellman法進(jìn)行總巰基檢測的試劑盒。試劑盒準(zhǔn)確性高，重復(fù)性和抗干擾性強(qiáng)，使用方便，可用于測各種動物的血清/血漿、組織、細(xì)胞、培養(yǎng)液以及植物組織樣本等。 生物體內(nèi)活性巰基（SH）主要包括巰基和蛋白質(zhì)巰基。巰基能夠修復(fù)氧化損傷的蛋白質(zhì)，參與活性氧清除。蛋白質(zhì)巰基主要存在于半，是蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和生物體內(nèi)某些氧化還原反應(yīng)重要基團(tuán)，在蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中2個巰基脫氫而形成的雙硫鍵，使相鄰多肽得以連接．對于維持蛋白質(zhì)完整結(jié)構(gòu)作用十分重要。巰基還是很多酶的活性基團(tuán)，一些重金屬鹽如Hg2+等與酶巰基結(jié)合，影響酶活性。巰基化合物與機(jī)體許多機(jī)能活動，藥物及毒物的作用以及某些疾病的發(fā)生發(fā)展有著密切關(guān)系。 所......

  • 產(chǎn)品型號：
  • 廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
  • 更新時間：2025-01-02
  • 訪  問  量：112

詳細(xì)介紹

保存溫度
2-8℃ 避光
注意事項(xiàng)
開蓋后組份按要求條件保存。
有效期
6個月
檢測方法
分光光度計(jì)
適用樣本
血清、血漿、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液、組織裂解液
產(chǎn)品應(yīng)用
分光光度計(jì)
儀器準(zhǔn)備
1.分光光度計(jì)
2.恒溫水浴鍋
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰盒

試劑準(zhǔn)備
1.生理鹽水
2.純水
3.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備
1.96孔板
2.吸頭

使用注意事項(xiàng)
1.試劑B2干粉開蓋使用前先敲入瓶底部，防止開蓋時灑落導(dǎo)致?lián)p失。
2.血清/培養(yǎng)液等液體樣本直接檢測或用生理鹽水稀釋后檢測。
3.檢出限為10μmol/L。
使用方法
1. 樣品準(zhǔn)備
組織樣本：按照組織質(zhì)量（g）：生理鹽水體積(mL)為1：5~10 的比例（建議稱取約0.1g 組織，加入1mL 生理鹽水）進(jìn)行冰浴勻漿，然后8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
血清，培養(yǎng)液：直接測定。

2. 試劑配制：
使用前，準(zhǔn)確吸取10ml試劑B1加入試劑B2干粉，充分溶解混勻，即成試劑B工作液，4℃避光保存。

3. 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長至412nm，蒸餾水調(diào)零。

4. 總巰基的測定
按下表在96孔板中加入試劑，對照孔每個樣品均做。
混勻，25℃靜置10min，測定412nm 吸光值。
ΔA=A 測定-A 對照。
【注】：
? 如果OD值太大，可以將樣品用試劑A稀釋后再檢測。

5. 計(jì)算
血清中總巰基含量（mmol/L）
=ΔA ÷0.8618×V 反總÷V 樣×103
=5800×ΔA

組織細(xì)胞中總巰基含量（mmol/g）
（1）按樣本重量計(jì)算
總巰基含量（μmol/g 鮮重）
=ΔA ÷0.8618×V 反總÷（V 樣÷V 樣總×W）
=5.8×ΔA÷W

（2）按樣本蛋白濃度計(jì)算
總巰基含量（μmol/mg prot）
=ΔA ÷0.8618×V 反總÷（V 樣×Cpr）
=5.8×ΔA÷Cpr

【注】：
V 反總：反應(yīng)總體積，0.2mL；
V 樣：反應(yīng)中樣品體積，0.04mL；
V 樣總：加入提取液體積，1mL；
W：樣品質(zhì)量，g ；
Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；
103 ：1mmol/ L=103μmol/ L

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