2-8℃ 避光

開蓋后組份按要求條件保存。

一年

分光光度計(jì)

植物

分光光度計(jì)

1.離心機(jī)
2.水浴鍋或恒溫箱
3.分光光度計(jì)

1.蒸餾水
2.氫氧化鈉溶液

1.離心管
2.吸頭

1. 試劑盒里的低溫試劑避免反復(fù)凍融，以免失效或效率下降；
2. 待測(cè)樣品如不能及時(shí)測(cè)定，請(qǐng)置于2-8℃保存，3天內(nèi)穩(wěn)定；
3. 如果樣品還原糖濃度過高，用蒸餾水稀釋后測(cè)定，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；
4. 總糖計(jì)算公式在測(cè)定干擾雜質(zhì)很少、還原糖含量相對(duì)總糖含量很少時(shí)使用，x0.9 是為了從測(cè)定出的總糖水解成單糖中，扣除水解時(shí)所消耗的水量。

1. 還原糖的提取：
①稱取植物樣品0.5－3g，剪碎，加入蒸餾水約3ml勻漿，轉(zhuǎn)移至燒杯或三角瓶中，用12ml蒸餾水沖洗研磨器2－3次，洗出液也轉(zhuǎn)移至該容器。
②50℃水浴30min，并不時(shí)攪拌，以便還原糖浸出。
③將沉淀和浸出液轉(zhuǎn)移至50ml離心管，4000g離心5min。
④留取上清液，向沉淀中加入20ml蒸餾水，混勻，再次4000g離心5min。
⑤留取上清液，將2次獲得的上清液合并，用蒸餾水定容至100ml(提取液)，混勻，作為還原糖待測(cè)液。

2. 總糖的水解和提取：
①稱取植物樣品0.5－3g，剪碎，加入蒸餾水約3ml勻漿，轉(zhuǎn)移至燒杯或三角瓶中，用12ml蒸餾水沖洗研磨器2－3次，洗出液也轉(zhuǎn)移至該容器。
②向容器中加入10ml 6M鹽酸溶液，攪拌均勻，煮沸30min，并不時(shí)攪拌。
③取2滴滴加于載玻片上，滴加1滴顯色液，檢查水解是否，如已經(jīng)水解，則不顯示藍(lán)色。
④水解完畢后，冷卻至室溫，加入6M氫氧化鈉溶液，使溶液pH至7.4，用蒸餾水定容至100ml，混勻，4000g離心5min或過濾。
⑤取上清或?yàn)V液10ml，用蒸餾水定容至100ml，成稀釋1000倍的總糖水解液(提取液)，取1ml總糖水解液，測(cè)定其還原糖的含量。

3. 制作葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線：
取干凈離心管或試管，按下表進(jìn)行操作，以0號(hào)調(diào)零，檢測(cè)540nm處吸光度，以吸光度值為縱坐標(biāo)，各標(biāo)準(zhǔn)濃度(mg/ml)為橫坐標(biāo)作圖得標(biāo)準(zhǔn)曲線。
4、還原糖測(cè)定：
取制備好的還原糖提取液或者總糖水解液1ml，分別加入DNS檢測(cè)液2ml，其余操作同標(biāo)準(zhǔn)曲線的操作，540nm處測(cè)定各管的吸光度。

5. 計(jì)算：
還原糖的百分含量：還原糖含量（%）=（C x VT）/(m x Vs) x 100

總糖的百分含量：總糖含量（%）=（C x VT）/(m x Vs) x 100x 10 x 0.9

式中：C=從標(biāo)準(zhǔn)曲線查的糖量（mg）
VT=提取液的體積（ml）
m=植物樣品的質(zhì)量（mg）
Vs=測(cè)定時(shí)用的樣品體積（ml）