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腦組織蛋白提取試劑盒

簡要描述:產品概述 product description 貝博® BBproExtra® 腦組織蛋白提取試劑盒提供全套試劑,適用于從各種動物實體腦組織中提取總蛋白。 本試劑盒含有的配方能夠有效溶解細胞膜組份,包括細胞質膜、核膜和各種細胞器膜。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對蛋白的降解,為提取高純度的蛋白提供了保證。 本試劑盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質電泳、免疫沉淀、ELISA、轉錄活性分析、Gel shift凝膠阻滯實驗、酶活性測定等下游蛋白研究實驗。 本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構象的活性蛋白。 本試劑盒中不含有EDTA,與金屬螯和層析等下游應用兼容。

  • 產品型號:
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2024-11-24
  • 訪  問  量:105

詳細介紹

保存溫度
2-8℃
注意事項
1.蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。
2.蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
3.試劑拆封后請盡快使用完!
有效期
一年
檢測方法
WB,IP等
適用樣本
動物組織
產品特點
1.使用方便,從細胞,組織中提取蛋白不需經過研磨、反復凍融、超聲破碎等前處理。
2.提取過程簡單方便,將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
3.含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
4.紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
5.總蛋白提取液含多種有效成分,可以充分釋放胞漿蛋白、核蛋白和膜蛋白,又可結合釋出的蛋白防止沉淀。
6.蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64,每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
產品應用
WB,IP等
儀器準備
1.離心機
2.振蕩器
3.勻漿機/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準備
1.PBS緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用注意事項
使用注意事項:
? 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
? 蛋白酶抑制劑在2-8℃時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
? 實驗過程中的所有試劑須預冷;所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。
? 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀,不影響使用,溶解后正常使用。
? 如果試劑盒不能短時間內用完,蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
? 可以根據自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
? 下游實驗如果是進行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性檢測,提取液可以不加蛋白酶抑制劑或磷酸酶抑制劑,注意提取過程保持低溫操作,縮短離心時間。
使用方法
1. 提取液制備:
每500 μl冷的蛋白提取液中加入2 μl蛋白酶抑制劑混合物,混勻后置冰上備用。
2. 取50-100mg組織樣本用剪刀剪碎,加入500 μl蛋白提取液,用組織勻漿器/勻漿機勻漿至無明顯肉眼可見固體。
3. 將組織勻漿吸入一預冷的干凈離心管中,在4℃條件下振蕩10-30分鐘。
4. 在4℃,14000×g條件下離心15分鐘。
5. 將上清吸入另一預冷的干凈離心管,即得到腦組織總蛋白。
6. 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌嶒灐?br>
常見問題分析
1.蛋白濃度低?
處理部分組織樣本時可能沒有裂解,導致蛋白濃度低。只要適當延長試劑A的處理時間即可。在持續(xù)振蕩的條件下處理,沒有振蕩器也可間隔幾分鐘用吸頭吹打混勻。

2.用什么方法定量蛋白?
建議用BCA法。不適合用Bradford法,因為試劑A中含有干擾Bradford法的組份,導致定量不準。如果已經進行過透析處理或者用脫鹽柱改換過緩沖體系,則可以用Bradford法定量。
3.提取的蛋白具有活性嗎?
本試劑盒不含有離子型去垢劑組份,不破壞蛋白的結構,沒有對蛋白質之間原有的相互作用的破壞,蛋白均保持其天然構象和活性。
參考文獻
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Silent Mating–Type Information Regulation 2 Homolog 1 Attenuates the Neurotoxicity Associated with Alzheimer Disease via a Mechanism Which May Involve Regulation of Peroxisome Proliferator-Activated Receptor Gamma Coactivator 1-α
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Tat PTD-Endostatin-RGD: A novel protein with anti-angiogenesis effect in retina via eye drops
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