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DAPI染色液

簡(jiǎn)要描述：產(chǎn)品概述 product description 貝博® BBcellProbe® DAPI染色試劑用于普通的細(xì)胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色，染色后可用熒光顯微鏡檢測(cè)或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。DAPI (diamidino-2-phenylindole) 能與雙鏈DNA小槽，特別是AT堿基結(jié)合，也可插入少于3個(gè)連續(xù)AT堿基對(duì)的DNA序列中。當(dāng)它與雙鏈DNA結(jié)合時(shí)，熒光強(qiáng)度增強(qiáng)20倍，而與單鏈DNA結(jié)合則無(wú)熒光增強(qiáng)現(xiàn)象，因此是一種簡(jiǎn)易、快速和敏感地檢測(cè)DNA的方法。 DAPI的熒光強(qiáng)度較Hoechst低，但熒光穩(wěn)定性優(yōu)于Hoechst；其特異性較溴化乙啶和碘化丙啶高。

  • 產(chǎn)品型號(hào)：
  • 廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間：2024-11-23
  • 訪  問(wèn)  量：135

詳細(xì)介紹

保存溫度
2-8℃ 避光
注意事項(xiàng)
1.長(zhǎng)期不用可以-20℃保存。
2.染色液避免反復(fù)凍融。
3.試劑拆封后請(qǐng)盡快使用完！
有效期
六個(gè)月
檢測(cè)方法
流式細(xì)胞儀/熒光顯微鏡/激光共聚焦
適用樣本
動(dòng)物細(xì)胞
產(chǎn)品應(yīng)用
流式細(xì)胞儀/熒光顯微鏡/激光共聚焦
儀器準(zhǔn)備
1.熒光顯微鏡/激光共聚焦
2.離心機(jī)
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
試劑準(zhǔn)備
1.PBS緩沖液 2.HBSS
耗材準(zhǔn)備
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用注意事項(xiàng)
1.螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體收集至管底，避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
2.細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
3.染色后立即進(jìn)行分析。
4.染色時(shí)間根據(jù)不同樣本的實(shí)際染色結(jié)果做相應(yīng)調(diào)整。
5.本染色液可用于培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)胞涂片、石蠟切片、冰凍切片的檢測(cè)。石蠟切片用常規(guī)方法脫蠟、分化、冰凍切片用冰丙酮固定后檢測(cè)。
6.根據(jù)樣本情況和下游的檢測(cè)儀器選擇合適的染色方法，只要在染色時(shí)染色工作液能充分覆蓋細(xì)胞樣本即可。
7.活細(xì)胞原位染色可能需要較長(zhǎng)時(shí)間，可將染液加入培養(yǎng)基后避光孵育1-4小時(shí)，或更長(zhǎng)時(shí)間。
8.以下以培養(yǎng)細(xì)胞的涂片的熒光顯微鏡檢測(cè)為例，細(xì)胞染色不需要固定，也可以固定后染色，其他方法請(qǐng)參閱相關(guān)資料。
使用方法
1. 染色工作液的配制：
根據(jù)樣品數(shù)用PBS將DAPI染色液10-100倍稀釋，配制成染色工作液。
2. 細(xì)胞涂片的制備：
貼壁細(xì)胞，可將蓋玻片放于培養(yǎng)器皿中，讓培養(yǎng)細(xì)胞長(zhǎng)于玻片上，然后用藥物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡后取出，用4%多聚甲醛固定5min。也可其他方式培養(yǎng)后收集細(xì)胞制作涂片檢測(cè)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，用藥物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡后，500-1000g離心5分鐘收集細(xì)胞，用PBS洗2次，收集調(diào)整細(xì)胞數(shù)為1X105/ml，涂片或用離心涂片，用4%多聚甲醛固定5min；
3. 用PBS洗滌涂片兩次。
4. 加適量染色工作液于涂片上，室溫避光染色5-20分鐘。
5. 用熒光顯微鏡檢測(cè)結(jié)果。染料-DNA復(fù)合物的激發(fā)波長(zhǎng)為360nm，發(fā)射波長(zhǎng)為454nm。

結(jié)果分析 ：
置于熒光顯微鏡下用360nm激發(fā)光觀察結(jié)果：DAPI染色呈藍(lán)白色熒光。
早期凋亡細(xì)胞呈現(xiàn)核濃縮，染色加深，或核染色質(zhì)呈新月形聚集于核膜一邊；晚期凋亡細(xì)胞表現(xiàn)為核碎裂成大小不等的圓形小體，并被細(xì)胞膜所包繞，即凋亡小體。
參考文獻(xiàn)
1.Xiaojun Zhou, et al.
BMP-2 Derived Peptide and Dexamethasone Incorporated Mesoporous Silica Nanoparticles for Enhanced Osteogenic Differentiation of Bone Mesenchymal Stem Cells
ACS Applied Materials & Interfaces 2015 （IF=8.097）

2.Siqin Huang, et al.
Protective Effect of Electroacupuncture on Neural Myelin Sheaths is Mediated via Promotion of Oligodendrocyte Proliferation and Inhibition of Oligodendrocyte Death After Compressed Spinal Cord Injury
Molecular Neurobiology 2015 （IF=5.397）

3.Wei Feng, et al.
Polyelectrolyte multilayer functionalized mesoporous silica nanoparticles for pH-responsive drug delivery: layer thickness-dependent release profiles and biocompatibility
Journal of Materials Chemistry 2013 （IF=6.101）

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